Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
SULT1E1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423185
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SULT1E1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SULT1E1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SULT1E1 Anticorpo (E-12): sc-376009
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SULT1E1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423185 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Sult1e1 codifica a sulfotransferase de estrogénios (SULT1E1), uma enzima citosólica de conjugação de fase II que catalisa a sulfatação de estrogénios para gerar sulfatos de esteroides inativos e mais solúveis em água. Ao regular o equilíbrio entre estrogénios ativos e conjugados, a SULT1E1 influencia a sinalização do recetor de estrogénios e a comunicação cruzada com vias hepáticas de metabolismo de xenobióticos, incluindo interações com a homeostase de esteroides, o processamento de ácidos biliares e redes mais amplas de sulfotransferases. Alterações na atividade da SULT1E1 podem deslocar programas transcricionais dependentes de hormonas e têm sido associadas a estados metabólicos e inflamatórios no fígado e no tecido adiposo, bem como a fenótipos responsivos a hormonas na biologia reprodutiva. Em modelos murinos, o Sult1e1 é, portanto, relevante para estudar a regulação endócrina, diferenças sexuais no metabolismo e o controlo específico por tecido da sinalização de esteroides.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SULT1E1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Sult1e1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Sult1e1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Sult1e1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SULT1E1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Sult1e1 para a investigação da sinalização de SULT1E1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Sult1e1 críticos para a função SULT1E1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Sult1e1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SULT1E1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo SULT1E1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Sult1e1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SULT1E1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR SULT1E1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Sult1e1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Sult1e1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.