SULT1C4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-417528

Visão geral

SULT1C4 codifica uma sulfotransferase citosólica que catalisa a transferência de sulfato do 3′-fosfoadenosina-5′-fosfossulfato (PAPS) para substratos contendo grupos hidroxila e amina, gerando metabólitos sulfatados com solubilidade e bioatividade alteradas. Essa reação de conjugação de fase II contribui para a desintoxicação de xenobióticos e para a modulação de moléculas sinalizadoras endógenas, interagindo com redes celulares mais amplas que controlam o equilíbrio redox, a responsividade hormonal e a depuração de metabólitos. Variações na atividade das sulfotransferases podem influenciar o destino metabólico de substâncias químicas ambientais e de fármacos, tornando o SULT1C4 relevante para estudos sobre diferenças interindividuais na sensibilidade a compostos químicos e no metabolismo específico de tecidos. A capacidade de sulfatação desregulada também tem sido associada na literatura a alterações na biologia da exposição e a fenótipos metabólicos relacionados a doenças, sustentando o uso de SULT1C4 como um nó funcional em pesquisas centradas no metabolismo.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SULT1C4 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SULT1C4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SULT1C4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SULT1C4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SULT1C4.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SULT1C4 para a investigação da sinalização de SULT1C4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SULT1C4 críticos para a função SULT1C4
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SULT1C4 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo SULT1C4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo SULT1C4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SULT1C4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo SULT1C4 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR SULT1C4 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SULT1C4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SULT1C4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.