SULT1C4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-417528

Descripción general

SULT1C4 codifica una sulfotransferasa citosólica que cataliza la transferencia de un grupo sulfato desde la 3′-fosfoadenosina-5′-fosfosulfato (PAPS) a sustratos que contienen grupos hidroxilo o amina, generando metabolitos sulfatados con solubilidad y bioactividad alteradas. Esta reacción de conjugación de fase II contribuye a la desintoxicación de xenobióticos y a la modulación de moléculas endógenas de señalización, y se integra con redes celulares más amplias que controlan el equilibrio redox, la respuesta hormonal y la depuración de metabolitos. Las variaciones en la actividad de las sulfotransferasas pueden influir en el destino metabólico de sustancias químicas ambientales y fármacos, lo que hace que SULT1C4 sea relevante para estudios de diferencias interindividuales en sensibilidad a químicos y metabolismo específico de tejido. La capacidad de sulfatación desregulada también se ha vinculado en la literatura con cambios en la biología de la exposición y fenotipos metabólicos asociados a enfermedades, lo que respalda el uso de SULT1C4 como un nodo funcional en investigaciones centradas en el metabolismo.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SULT1C4 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SULT1C4 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SULT1C4 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SULT1C4 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SULT1C4.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SULT1C4 para la investigación de la señalización de SULT1C4, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de SULT1C4 críticos para la función de SULT1C4
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SULT1C4 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SULT1C4 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SULT1C4 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SULT1C4. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SULT1C4 (h) y el plásmido HDR SULT1C4 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SULT1C4 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SULT1C4 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.