Stim2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-431161

개요

Stim2(스트로말 상호작용 분자 2)는 소포체(ER)의 Ca2+ 센서로, ER 내 Ca2+ 저장고가 고갈되면 ER–세포막 접합부에서 Orai 채널 활성을 조절해 저장고 작동성 칼슘 유입(SOCE)과 연결합니다. 마우스 세포에서 STIM2는 기저 세포질 Ca2+ 수준을 유지하는 데 도움을 주고, NFAT 주도 전사, 시냅스 기능, 면역세포 활성화 프로그램에 영향을 미치는 Ca2+ 의존성 신호의 크기와 지속 시간을 조율합니다. 이러한 칼슘 신호 네트워크를 통해 Stim2는 신경 흥분성과 가소성, 사이토카인 반응, 세포 스트레스 적응 등 다양한 과정과 연관됩니다. SOCE와 STIM2 의존성 신호가 비정상적으로 조절되면 신경염증, 자가면역, 세포 생존 경로의 변화와 같은 질환 관련 기전에 관여하는 것으로 보고되어, Stim2는 기전 연구를 위한 유용한 표적이 됩니다.

Stim2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Stim2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Stim2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Stim2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Stim2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Stim2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Stim2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Stim2 기능에 중요한 Stim2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Stim2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Stim2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Stim2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Stim2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Stim2 HDR 플라스미드 (m) 및 Stim2 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Stim2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Stim2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.