Stat2 Double Nickaseプラスミド (h): sc-417454-NIC

STAT2は、I型およびIII型インターフェロンシグナル伝達における中心的な転写因子であるStat2をコードしており、STAT1およびIRF9とともにISGF3複合体を形成して、インターフェロン刺激遺伝子（ISG）の発現を誘導します。IFNARが活性化されると、JAK1およびTYK2がStat2をリン酸化し、これにより核内移行が可能となって、抗ウイルス防御、抗原提示、ならびに自然免疫におけるクロストークの制御に関与します。Stat2の活性はサイトカインネットワークや細胞内在性の制限（制御）経路にも影響し、ウイルス感染や炎症性シグナルに対する応答を形作ります。STAT2シグナルの制御異常は、先天性免疫異常症や、感染症および免疫介在性疾患表現型に対する感受性の変化と関連づけられており、そのため機構免疫学研究において頻繁に研究対象となっています。

Stat2 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における STAT2 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、STAT2内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、STAT2の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。

編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、STAT2が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。