STAMBP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404726

Visão geral

STAMBP codifica uma enzima desubiquitinante da família JAMM (AMSH) que se liga a componentes do ESCRT-0, como STAM e HGS, para editar cadeias de ubiquitina em cargas endocitadas. Ao regular a triagem dependente de ubiquitina, a STAMBP ajuda a controlar a redução de receptores na membrana, o tráfego endossomal e a degradação lisossomal, moldando assim os desfechos de sinalização de vias que incluem o EGFR e outros receptores de fatores de crescimento. A atividade da STAMBP contribui para a proteostase e para respostas ao estresse celular por meio da modulação da topologia das cadeias de ubiquitina e de decisões sobre o destino das cargas nos endossomos precoces. A disrupção de STAMBP tem sido associada a fenótipos de neurodesenvolvimento e à desregulação imunológica, tornando-a um alvo útil para estudar defeitos na via endossomo–lisossomo e a sinalização por ubiquitina em células humanas.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO STAMBP (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene STAMBP em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do STAMBP, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do STAMBP na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína STAMBP.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de STAMBP para a investigação da sinalização de STAMBP, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) STAMBP críticos para a função STAMBP
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos STAMBP para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo STAMBP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo STAMBP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus STAMBP. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo STAMBP Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR STAMBP (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia STAMBP para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo STAMBP definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.