St3Gal-I Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-422935-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- St3Gal-IO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase St3Gal-I (m) e o Plasmídeo Double Nickase St3Gal-I (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para St3gal1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
St3Gal-I Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-422935-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
St3Gal-I Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-422935-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O St3gal1 murino codifica a sialiltransferase residente no Golgi St3Gal-I, que catalisa a transferência de ácido siálico numa ligação α2,3 para Galβ1-3GalNAc em O-glicanos do núcleo 1, moldando o estado de sialilação de glicoproteínas do tipo mucina. Ao modular as estruturas glicânicas terminais, a St3Gal-I influencia a estabilidade das glicoproteínas, as interações recetor–ligando e os processos de adesão célula–célula ou célula–matriz, centrais para a regulação imunitária e a biologia epitelial. Esta enzima é um componente-chave das vias de O-glicosilação que afetam o tráfego de membrana e os microambientes de sinalização, com impactos a jusante na inflamação e na remodelação de glicanos associada a tumores. Alterações na atividade da ST3GAL1 e epítopos α2,3-sialilados são frequentemente estudados em contextos como o desenvolvimento de células imunitárias, a adesão associada à metastização e mecanismos de evasão imune mediados por glicanos.
St3Gal-I O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus St3gal1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de St3gal1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função St3gal1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com St3gal1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.