SSRP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401780

Visão geral

SSRP1 (proteína de reconhecimento específica de estrutura 1) é uma subunidade essencial do complexo FACT de remodelação da cromatina, que facilita a desmontagem e a remontagem de nucleossomos durante a transcrição, a replicação do DNA e o reparo do DNA. Ao coordenar a atividade de chaperona de histonas com a progressão da RNA polimerase II e a dinâmica das forquilhas de replicação, a SSRP1 ajuda a manter a estabilidade do genoma e regula a acessibilidade da cromatina. Processos dependentes de SSRP1 se cruzam com o controle do ciclo celular, as respostas a danos no DNA e a regulação epigenética, tornando-a relevante para estudos de estresse replicativo e de programas transcricionais aberrantes. A desregulação da atividade de FACT/SSRP1 tem sido implicada em estados oncogênicos da cromatina e em capacidade proliferativa alterada, sustentando seu uso como um nó mecanístico em biologia do câncer e em pesquisas de manutenção do genoma.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SSRP1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SSRP1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SSRP1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SSRP1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SSRP1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SSRP1 para a investigação da sinalização de SSRP1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SSRP1 críticos para a função SSRP1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SSRP1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo SSRP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo SSRP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SSRP1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo SSRP1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR SSRP1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SSRP1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SSRP1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.