Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
SRp30c Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403790
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SRp30c O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SRp30c, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SRp30c Anticorpo (1G7): sc-293314
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SRp30c Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403790 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
SRSF9 codifica o fator de splicing rico em serina/arginina SRp30c, uma proteína de ligação a RNA que contribui para a seleção de sítios de splicing e a definição de éxons durante o processamento do pré-mRNA. Por meio de interações com potenciadores exônicos de splicing e outras proteínas SR, o SRp30c ajuda a coordenar programas de splicing alternativo que moldam o repertório de isoformas de transcritos, acoplando o processamento de RNA à transcrição e ao destino subsequente do mRNA. Essas decisões de splicing podem influenciar o controle do ciclo celular, respostas ao estresse e redes de expressão gênica associadas à diferenciação. A atividade desregulada de proteínas SR e padrões de splicing alterados estão amplamente implicados na biologia do câncer e de doenças neurodegenerativas, tornando o SRSF9 um ponto relevante para estudos mecanísticos de fenótipos dirigidos por splicing.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SRp30c (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SRSF9 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SRSF9, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SRSF9 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SRp30c.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SRSF9 para a investigação da sinalização de SRp30c, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SRSF9 críticos para a função SRp30c
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SRSF9 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SRp30c Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo SRp30c Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SRSF9. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SRp30c Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR SRp30c (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SRSF9 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SRSF9 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.