SPEN CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406083

개요

SPEN(또는 SHARP로도 알려짐)은 핵 내에서 작용하는 대형 RNA 결합 전사 공조절자를 암호화하며, 서열 특이적 DNA 결합 파트너와 긴 비암호화 RNA(lncRNA)를 크로마틴 변형 복합체에 연결하는 역할을 합니다. SPEN은 SMRT/HDAC 및 관련 억제인자들과의 상호작용을 통해 XIST 의존적 X 염색체 불활성화를 포함한 전사 침묵화 프로그램에 기여하고, 계통(라인리지) 특이적 유전자 발현에도 영향을 미칩니다. 또한 SPEN은 신호 반응성 전사 출력도 조절하며, Notch 관련 조절과의 연관성 및 발달·면역 관련 경로 전반에 걸친 보다 광범위한 후성유전학적 제어와의 연결이 보고되어 있습니다. SPEN의 기능 또는 발현이 비정상적으로 조절되면 여러 질환 맥락에서 관찰되는 분화 상태의 변화와 전사 프로그램 재배선과 연관되는 것으로 알려져 있으며, 이는 SPEN이 유전자 조절 연구에서 기전적 핵심 노드로 유용함을 뒷받침합니다.

SPEN CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 SPEN 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 SPEN 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 SPEN의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 SPEN 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 SPEN 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 SPEN 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• SPEN 기능에 중요한 SPEN 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 SPEN 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• SPEN CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 SPEN CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 SPEN 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  SPEN HDR 플라스미드 (h) 및 SPEN HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 SPEN 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 SPEN 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.