SP140 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-409816

概要

SP140は核内のクロマチン関連タンパク質をコードしており、主に造血系および免疫系の細胞系列で発現し、転写制御や細胞状態の制御に寄与します。SAND、PHD、そしてブロモドメイン様モジュールを含むSP100/SP140ファミリーの一員として、SP140はクロマチンの特徴の認識や、炎症および分化プログラムを調整する制御複合体の形成に関与すると考えられています。また、サイトカインによって駆動される転写応答の調節やマクロファージの活性化状態の制御などを含む、自然免疫および獲得免疫のシグナル伝達経路への関与が示唆されています。遺伝学的および機能的研究により、SP140活性の変化が免疫介在性疾患と関連することが示されており、免疫遺伝子制御やエピジェネティック制御の機構を解明するうえで有用な標的となります。

SP140 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSP140遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SP140内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SP140のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SP140タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SP140シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SP140欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SP140の機能に不可欠なSP140エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SP140ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SP140 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSP140 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SP140遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SP140 HDRプラスミド（h）および SP140 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSP140ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSP140標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。