SP-lyase Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402278-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SP-lyaseO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SP-lyase (h) e o Plasmídeo Double Nickase SP-lyase (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SGPL1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SP-lyase Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402278-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SP-lyase Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402278-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SGPL1 codifica a liasa de esfingosina-1-fosfato (SP-liase) humana, uma enzima associada ao retículo endoplasmático que catalisa a clivagem irreversível da esfingosina-1-fosfato (S1P) em hexadecenal e fosfoetanolamina. Ao encerrar a sinalização por S1P e conectar o catabolismo de esfingolipídios à biossíntese de fosfolipídios, a SP-liase regula a homeostase lipídica, a composição de membranas e gradientes de lipídios bioativos que influenciam a migração celular, a sobrevivência e respostas inflamatórias. A atividade de SGPL1 intersecciona-se com o metabolismo de esfingolipídios, a dinâmica do reostato ceramida/S1P e vias de sinalização a jusante mediadas por GPCR que moldam respostas celulares ao estresse e a função de barreira. Alterações genéticas de SGPL1 estão associadas a distúrbios multissistêmicos com perfis de esfingolipídios desregulados, sustentando sua relevância para estudos mecanísticos de fenótipos impulsionados por lipídios.
SP-lyase O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SGPL1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SGPL1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SGPL1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SGPL1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.