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Sos 1慢病毒激活颗粒(h) | sc-401135-LAC | 200 µl | $455.00 |
SOS1 基因编码 Son of sevenless homolog 1(Sos 1),这是一种 Ras 鸟嘌呤核苷酸交换因子(GEF),可在受体酪氨酸激酶被激活并通过 GRB2 等接头蛋白复合体传递信号后,催化 RAS 上 GDP 向 GTP 的交换。Sos 1 将生长因子信号与 RAS–RAF–MEK–ERK 通路相连接,并与 PI3K–AKT 通路活性发生交汇,从而参与调控细胞增殖、分化、迁移以及细胞骨架动态。SOS1 功能改变或上游信号失调可改变 MAPK 通路输出,这与肿瘤信号依赖性研究以及发育相关的 Rasopathy 机制研究密切相关。因此,SOS1 是在人类细胞中解析刺激特异性的 MAPK 信号幅度与持续时间、反馈调控以及通路串扰的一个重要节点。
Sos 1 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 SOS1 表达。
Sos 1 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在SOS1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性Sos 1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 SOS1 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。