SMEK1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-412572-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SMEK1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SMEK1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase SMEK1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PPP4R3A. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SMEK1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-412572-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SMEK1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-412572-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PPP4R3A codifica a SMEK1, uma subunidade regulatória da fosfatase proteica 4 que ajuda a direcionar a atividade catalítica da PP4 para substratos específicos e compartimentos subcelulares. A SMEK1 participa do controle, dependente de fosforilação, da progressão do ciclo celular, das respostas a danos no DNA e da sinalização adaptativa ao estresse, ao modular eventos de desfosforilação que moldam a cromatina e os desfechos de checkpoints. Por meio dessas funções, PPP4R3A é relevante para mecanismos que influenciam a estabilidade do genoma e programas de proliferação comumente alterados na biologia do câncer. A regulação de fosfatases associada à SMEK1 também tem sido investigada em contextos de diferenciação e homeostase tecidual, nos quais a fidelidade da sinalização impacta fenótipos celulares associados a doenças.
SMEK1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PPP4R3A em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PPP4R3A. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PPP4R3A. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PPP4R3A interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.