SLC6A14 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-408198

概要

SLC6A14（ATB0,+とも呼ばれる）は、ナトリウムおよび塩化物依存性の形質膜トランスポーターをコードしており、中性および塩基性（カチオン性）アミノ酸を濃縮的に取り込むことを担います。必須アミノ酸を含む幅広い基質に対応できる点が特徴です。細胞内のアミノ酸利用可能性を調節することで、SLC6A14はmTORC1などの栄養感知・代謝シグナル伝達経路に影響を及ぼし、細胞増殖、レドックス恒常性、ストレス適応を規定します。その発現は上皮における輸送生理と関連づけられており、栄養獲得や代謝が再配線される疾患状況では、アミノ酸フラックスの変化とも結び付けられています。細胞表面の溶質キャリアとして、SLC6A14は、増殖・分化・免疫—代謝相互作用に対するアミノ酸輸送の寄与を解析するうえで扱いやすい標的（ノード）となります。

SLC6A14 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSLC6A14遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SLC6A14内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SLC6A14のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SLC6A14タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SLC6A14シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SLC6A14欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SLC6A14の機能に不可欠なSLC6A14エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SLC6A14ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SLC6A14 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSLC6A14 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SLC6A14遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SLC6A14 HDRプラスミド（h）および SLC6A14 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSLC6A14ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSLC6A14標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。