Plásmido Doble Nickase (h) SLC35C1: sc-410008-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)SLC35C1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa SLC35C1 (h) y el plásmido de doble nickasa SLC35C1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a SLC35C1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) SLC35C1 | sc-410008-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) SLC35C1 | sc-410008-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC35C1 codifica el transportador de GDP‑L‑fucosa localizado en el aparato de Golgi, que suministra fucosa activada a las glicosiltransferasas luminales, permitiendo la fucosilación central de los N‑glicanos y la fucosilación de ligandos de selectinas. Al controlar la capacidad de fucosilación celular, SLC35C1 influye en la adhesión y el tráfico de leucocitos, el reconocimiento célula–célula y, de forma más amplia, en la señalización dependiente de glicanos en las vías secretoras y endocíticas. Las variantes con pérdida de función se asocian a trastornos congénitos de la glicosilación caracterizados por fucosilación defectuosa y disfunción inmunológica, lo que convierte a SLC35C1 en un nodo clave para estudiar la regulación del glicoma. Por ello, la alteración de SLC35C1 se utiliza ampliamente para dilucidar cómo el transporte de azúcares nucleótido moldea la adhesión, la señalización relacionada con la inflamación y la maduración de glicoproteínas en células humanas.
SLC35C1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SLC35C1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SLC35C1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SLC35C1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SLC35C1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.