SLC35A2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423599

Visão geral

Slc35a2 codifica a SLC35A2, um transportador de UDP-galactose residente no complexo de Golgi que importa substratos de açúcares nucleotídicos para a via secretória, sustentando a galactosilação de glicoproteínas e glicolipídios. Ao regular a maturação dos glicanos, a SLC35A2 influencia o dobramento proteico, o tráfego vesicular, a adesão célula–célula e a sinalização de receptores, com efeitos a jusante em vias que dependem de uma glicosilação adequada na superfície celular. A perturbação do transporte de UDP-galactose pode alterar a homeostase do RE/Golgi e a função de proteínas de membrana, impactando processos como o desenvolvimento neuronal e as interações de células imunes. A glicosilação desregulada ligada à SLC35A2 tem sido associada a distúrbios congênitos da glicosilação e a fenótipos mais amplos envolvendo o neurodesenvolvimento e a função de tecidos epiteliais, tornando-a um alvo relevante para estudos mecanísticos em modelos murinos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SLC35A2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Slc35a2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Slc35a2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Slc35a2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SLC35A2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Slc35a2 para a investigação da sinalização de SLC35A2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Slc35a2 críticos para a função SLC35A2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Slc35a2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo SLC35A2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo SLC35A2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Slc35a2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo SLC35A2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR SLC35A2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Slc35a2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Slc35a2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.