SLC25A33 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-413606

概要

SLC25A33は、ミトコンドリア内膜に存在するキャリアタンパク質をコードしており、ミトコンドリア内での核酸代謝に必要なピリミジンヌクレオチドの輸送に関与すると考えられています。ミトコンドリアDNAの複製、転写、RNAのターンオーバーを支えることで、SLC25A33はヌクレオチド恒常性を酸化的リン酸化能や、より広範なミトコンドリアの品質管理プロセスと結び付けています。ミトコンドリアにおけるヌクレオチド輸送が変化すると、バイオエネルギー代謝が乱れ、複製ストレスが増大し得るため、このキャリアファミリーは神経変性、代謝異常、増殖性疾患といった文脈に関わる機序とも関連付けられます。その結果、SLC25A33はミトコンドリアの維持、レドックスバランス、ストレス適応シグナル伝達のモデルにおいて、しばしば研究対象となっています。

SLC25A33 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSLC25A33遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SLC25A33内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SLC25A33のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SLC25A33タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SLC25A33シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SLC25A33欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SLC25A33の機能に不可欠なSLC25A33エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SLC25A33ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SLC25A33 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSLC25A33 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SLC25A33遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SLC25A33 HDRプラスミド（h）および SLC25A33 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSLC25A33ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSLC25A33標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。