Each CRISPR/Cas9 Knockout (KO) Plasmid product consists of a pool of 3 plasmids designed to ensure identification and cleavage of a specific gene for maximum knockout efficiency. Each plasmid encodes a unique 20 nt sequence derived from the GeCKO (v2) library.
SLC17A9 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-432833
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- SLC17A9 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在SLC17A9基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
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SLC17A9 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-432833 | 20 µg | $397.00 |
概述
Slc17a9 编码囊泡核苷酸转运体 SLC17A9（VNUT），该转运体将 ATP 及其他核苷酸装载进入分泌囊泡，从而实现受调控的嘌呤能信号传导。通过调控囊泡内 ATP 含量，SLC17A9 影响依赖胞吐的细胞间通讯，进而激活 P2X/P2Y 受体通路以及下游与 Ca²⁺ 和 MAPK 相关的反应，在神经与免疫环境中尤为重要。这一转运活性支持多种过程，包括神经递质传递、小胶质细胞激活以及炎症介质释放，因此 Slc17a9 是研究神经-免疫串扰与无菌性炎症的一个有用节点。囊泡 ATP 处理失衡及嘌呤能张力异常已被认为与疼痛信号传导、神经炎症和组织损伤应答有关，使 Slc17a9 成为在小鼠模型中解析相关通路时具有机制意义的研究靶点。
SLC17A9 CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Slc17a9基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Slc17a9基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Slc17a9开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使SLC17A9蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Slc17a9缺失的细胞模型，用于SLC17A9信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 SLC17A9 功能至关重要的 Slc17a9 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 Slc17a9 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 SLC17A9 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 SLC17A9 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Slc17a9 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 SLC17A9 HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 SLC17A9 HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Slc17a9同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Slc17a9靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。