SLAIN2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-429242

概要

Slain2は、微小管のプラス端追跡（+TIP）因子であるSLAIN2をコードしており、EBタンパク質や他の+TIP複合体と協調して、微小管の持続的な伸長、細胞皮質での捕捉、ならびに適切な紡錘体ダイナミクスを促進します。微小管依存性の輸送や細胞極性の組織化に関与することで、SLAIN2は有糸分裂の進行、細胞内輸送、神経突起の伸長などの過程を支えています。+TIPネットワークの攪乱や微小管安定性の変化は、神経発達・神経変性に関連する表現型だけでなく、増殖性の細胞状態における染色体不安定性とも広く関係します。そのため、マウスSlain2は、哺乳類システムにおける細胞分裂と分化の細胞骨格制御を解明するための扱いやすいモデルとなります。

SLAIN2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるSlain2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Slain2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Slain2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SLAIN2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SLAIN2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Slain2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SLAIN2の機能に不可欠なSlain2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Slain2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SLAIN2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびSLAIN2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Slain2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SLAIN2 HDRプラスミド（m）および SLAIN2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSlain2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSlain2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。