Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Ska2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405933
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Ska2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Ska2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Ska2 Anticorpo (H-2): sc-514495
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Ska2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405933 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
SKA2 codifica a subunidade 2 do complexo associado ao fuso e ao cinetócoro (Ska2), um componente central do complexo SKA que coopera com o complexo NDC80 para estabilizar as ligações cinetócoro–microtúbulo durante a mitose. A Ska2 apoia o alinhamento dos cromossomos (congressão cromossômica) e o início da anáfase ao promover uma ligação persistente de extremidade (“end-on”) aos microtúbulos e ao contribuir para o silenciamento do checkpoint do fuso. Por meio do seu papel na progressão mitótica, SKA2 influencia a dinâmica do ciclo celular, a fidelidade da segregação cromossômica e a estabilidade genômica. A desregulação da expressão ou da função de SKA2 tem sido associada a fenótipos proliferativos e à instabilidade cromossômica observados em múltiplos contextos de doença, tornando-o relevante para estudos mecanísticos de respostas ao estresse ligadas à divisão celular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Ska2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SKA2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SKA2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SKA2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Ska2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SKA2 para a investigação da sinalização de Ska2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SKA2 críticos para a função Ska2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SKA2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Ska2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Ska2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SKA2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Ska2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Ska2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SKA2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SKA2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.