SIP1/ZEB2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400655-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SIP1/ZEB2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SIP1/ZEB2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase SIP1/ZEB2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ZEB2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SIP1/ZEB2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400655-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SIP1/ZEB2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400655-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ZEB2 (também conhecido como SIP1) codifica um fator de transcrição do tipo “zinc finger” que se liga a E-box e atua predominantemente como um represssor transcricional, controlando a transição epitélio–mesênquima, a especificação de linhagens e decisões de destino celular. Ao se ligar a motivos E-box e recrutar complexos correpressores associados a CtBP/SMAD, SIP1/ZEB2 integra a sinalização de TGF-β/BMP a programas de remodelamento da cromatina para modular genes de polaridade epitelial, adesão celular e fenótipos migratórios. Redes transcricionais dependentes de ZEB2 contribuem para o desenvolvimento da crista neural e a diferenciação de células imunes, e a desregulação da expressão ou atividade de ZEB2 está ligada a síndromes do desenvolvimento e a estados de diferenciação alterados em contextos relevantes para o câncer. Essas propriedades fazem de ZEB2 um nó amplamente utilizado em estudos mecanísticos de controle transcricional, plasticidade e acoplamento entre sinalização e expressão gênica.
SIP1/ZEB2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ZEB2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ZEB2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ZEB2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ZEB2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.