Siglec-9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406675

概要

SIGLEC9はSiglec-9（シアル酸結合性免疫グロブリン様レクチン）をコードしており、主に好中球、単球、ならびに一部のNK細胞サブセットで発現し、抑制性受容体として機能します。免疫受容体チロシン抑制モチーフ（ITIM）依存的なシグナル伝達と、SHP-1/2などのホスファターゼのリクルートを介して、Siglec-9はパターン認識受容体やFc受容体経路の下流にある活性化シグナルを弱め、サイトカイン放出、脱顆粒、酸化バーストを調節します。宿主あるいは微生物表面のシアル化糖鎖を感知することで、粘膜や血管の接点における免疫恒常性の維持や炎症の調整に寄与します。SIGLEC9シグナルの異常やシアル化環境の変化は、慢性炎症性疾患、感染生物学、ならびに骨髄系細胞における腫瘍関連免疫抑制などの状況で研究されています。

Siglec-9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSIGLEC9遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SIGLEC9内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SIGLEC9のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Siglec-9タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Siglec-9シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SIGLEC9欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Siglec-9の機能に不可欠なSIGLEC9エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SIGLEC9ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Siglec-9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSiglec-9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SIGLEC9遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Siglec-9 HDRプラスミド（h）および Siglec-9 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSIGLEC9ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSIGLEC9標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。