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SH-PTP2双切口酶质粒(m) | sc-422503-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SH-PTP2双切口酶质粒(m2) | sc-422503-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Ptpn11 编码 SH-PTP2(SHP2),这是一种胞质蛋白酪氨酸磷酸酶,具有串联的 SH2 结构域,负责转导来自受体酪氨酸激酶、细胞因子受体以及免疫抑制性受体的信号。SH-PTP2 通过去磷酸化关键对接蛋白并调控衔接蛋白复合体,促进 RAS–MAPK/ERK 信号传导,并可影响 PI3K–AKT 和 JAK–STAT 通路的动态变化,从而塑造细胞增殖、分化与迁移等反应。Ptpn11 活性参与发育与造血相关的信号程序,而 SH-PTP2 依赖的网络失调也常在异常生长因子信号与免疫细胞功能的模型中被广泛研究。作为磷酸酪氨酸信号的枢纽型调控因子,Ptpn11 常用于探究小鼠细胞与组织中的通路串扰、反馈调控以及情境特异性的信号转导。
SH-PTP2 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Ptpn11 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Ptpn11内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Ptpn11的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Ptpn11基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。