Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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SF-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402334-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SF-1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SF-1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase SF-1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para NR5A1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SF-1 Anticorpo (A-1): sc-393592
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SF-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402334-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SF-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402334-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NR5A1 codifica o fator esteroidogênico 1 (SF-1), um fator de transcrição da família dos receptores nucleares órfãos que coordena o desenvolvimento das glândulas adrenais e das gônadas, bem como a função diferenciada das células esteroidogênicas. O SF-1 regula genes envolvidos na biossíntese de hormônios esteroides, no transporte de colesterol e na sinalização do eixo reprodutivo, integrando redes de receptores nucleares e programas transcricionais responsivos a cAMP/PKA. Na biologia humana, alterações na atividade de NR5A1 estão associadas a distúrbios do desenvolvimento sexual, insuficiência adrenal e esteroidogênese desregulada, tornando-o um nó central para o estudo da especificação de linhagens endócrinas e da expressão gênica regulada por hormônios. Por isso, o SF-1 é amplamente utilizado como ponto de partida molecular para investigar o controle transcricional de vias esteroidogênicas e decisões de destino do desenvolvimento em modelos celulares relevantes.
SF-1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus NR5A1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de NR5A1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função NR5A1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com NR5A1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.