SET7/9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (r): sc-437354

概要

SET7/9（SETD7とも呼ばれる）はリシンメチルトランスフェラーゼで、主にヒストンH3のLys4（H3K4）のモノメチル化（H3K4me1）を触媒し、非ヒストン基質も修飾することで転写出力やタンパク質の安定性を調節します。ラット細胞では、SET7/9の活性はクロマチンリモデリングと連携して、細胞周期の制御、分化プログラム、ストレス応答性遺伝子の発現を制御します。さらに、p53シグナルやNF-κB関連の炎症性転写に結び付く経路との、メチル化依存的なクロストークを介して、SET7/9はゲノム維持や刺激誘導性の転写ダイナミクスに影響を与えます。SET7/9機能の異常は、がん生物学、代謝・心血管系の表現型、炎症性疾患モデルに関わるエピジェネティックな変化と関連付けられており、エピジェネティクス研究における機構的ハブ（要所）としての有用性が示されています。

SET7/9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（r）は、rat細胞株における遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SET7/9タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SET7/9シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SET7/9の機能に不可欠なエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SET7/9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（r）およびSET7/9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（r2）によってコードされるgRNAは、遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SET7/9 HDRプラスミド（r）および SET7/9 HDRプラスミド（r2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定の標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。