Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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SEMA5B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406519
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SEMA5B O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SEMA5B, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SEMA5B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406519 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
SEMA5B codifica a semaforina-5B, uma molécula de orientação transmembrana que regula a comunicação célula–célula, a remodelação do citoesqueleto e a migração direcional por meio de interações com receptores plexina e proteoglicanos de sulfato de heparano. A sinalização de SEMA5B contribui para a orientação axonal e a organização de sinapses no sistema nervoso e pode influenciar programas de adesão e motilidade por vias dependentes de GTPases da família Rho. Alterações na sinalização de semaforinas têm sido associadas a fenótipos do neurodesenvolvimento e neuropsiquiátricos, bem como a papéis dependentes do contexto na invasão de células tumorais e na modulação do microambiente imune. Consequentemente, SEMA5B é amplamente estudado em mecanismos de conectividade neuronal, plasticidade e biologia de doenças relacionadas à migração.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SEMA5B (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SEMA5B em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SEMA5B, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SEMA5B na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SEMA5B.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SEMA5B para a investigação da sinalização de SEMA5B, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SEMA5B críticos para a função SEMA5B
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SEMA5B para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SEMA5B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo SEMA5B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SEMA5B. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SEMA5B Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR SEMA5B (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SEMA5B para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SEMA5B definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.