SEMA4C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422882
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SEMA4C O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SEMA4C, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SEMA4C Anticorpo (37): sc-136445
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SEMA4C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422882 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Sema4c codifica a semaforina-4C (SEMA4C), uma molécula de orientação transmembranar que sinaliza por meio de receptores do tipo plexina para regular a comunicação célula–célula, a migração direcional e a remodelação do citoesqueleto. Em tecidos de camundongo, a SEMA4C contribui para eventos de sinalização dependentes de contato que moldam o padrão neural e influenciam interações de células imunes, conectando vias de semaforinas a processos de desenvolvimento e inflamatórios. Os efeitos a jusante frequentemente convergem na regulação de GTPases da família Rho e em programas associados a MAPK que coordenam a dinâmica de adesão e a motilidade. Alterações na sinalização semaforina–plexina têm sido associadas a remodelação tecidual desregulada e a mudanças no microambiente imune, sustentando seu estudo em modelos relevantes para doenças sem implicar resultados terapêuticos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SEMA4C (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Sema4c em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Sema4c, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Sema4c na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SEMA4C.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Sema4c para a investigação da sinalização de SEMA4C, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Sema4c críticos para a função SEMA4C
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Sema4c para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SEMA4C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo SEMA4C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Sema4c. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SEMA4C Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR SEMA4C (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Sema4c para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Sema4c definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.