SEMA3G Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406077

Descripción general

SEMA3G codifica la semaforina-3G, una señal guía secretada que actúa a través de complejos receptores de neuropilina/plexina para regular la remodelación del citoesqueleto, la migración celular y el patrón tisular. Además de sus funciones en la guía axonal y el neurodesarrollo, SEMA3G influye en la gemación angiogénica y linfática y puede modular el comportamiento de células endoteliales e inmunitarias mediante señalización dependiente de semaforinas. Estos procesos se entrecruzan con vías que controlan la adhesión, la motilidad y la remodelación vascular, lo que convierte a SEMA3G en un nodo relevante para estudiar la biología del desarrollo y la regulación del movimiento celular impulsada por el microambiente. La alteración de la señalización por semaforinas se ha asociado con la progresión del cáncer y fenotipos relacionados con la metástasis, así como con disfunción vascular e inflamatoria, lo que respalda la investigación de SEMA3G en modelos relevantes para enfermedades.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SEMA3G (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SEMA3G en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SEMA3G junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SEMA3G tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SEMA3G.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SEMA3G para la investigación de la señalización de SEMA3G, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de SEMA3G críticos para la función de SEMA3G
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SEMA3G para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SEMA3G CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SEMA3G CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SEMA3G. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SEMA3G (h) y el plásmido HDR SEMA3G (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SEMA3G para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SEMA3G definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.