Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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SELB Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-409155
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- SELB El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico SELB, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: SELB Anticuerpo (G-9): sc-166521
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
SELB Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-409155 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
EEFSEC codifica el factor de elongación de la traducción específico para selenocisteína SELB (eEFSec), un componente central de la maquinaria especializada que inserta selenocisteína en codones UGA durante la síntesis de selenoproteínas humanas. SELB coopera con factores de unión a SECIS y con el Sec-tRNA para facilitar la recodificación traduccional, influyendo así en la homeostasis redox celular, las respuestas al estrés oxidativo y el control de calidad proteica mediante la producción de selenoenzimas. Al regular la producción de vías antioxidantes y de tiol-redox, la actividad de EEFSEC puede afectar la susceptibilidad al daño oxidativo y la señalización adaptativa al estrés. La desregulación de la biosíntesis de selenoproteínas se ha asociado con cambios en el tono inflamatorio y en fenotipos metabólicos, lo que convierte a EEFSEC en un objetivo relevante para estudios mecanísticos en biología redox vinculada a enfermedad.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO SELB (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen EEFSEC en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del EEFSEC junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de EEFSEC tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SELB.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en EEFSEC para la investigación de la señalización de SELB, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de EEFSEC críticos para la función de SELB
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de EEFSEC para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido SELB CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SELB CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus EEFSEC. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SELB (h) y el plásmido HDR SELB (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología EEFSEC para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana EEFSEC definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.