Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
SDHC Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405559
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- SDHC El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico SDHC, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: SDHC Anticuerpo (C-2): sc-515102
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
SDHC Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405559 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
SDHC codifica la subunidad C del complejo succinato deshidrogenasa, un componente integral de membrana del Complejo II mitocondrial que ancla la enzima a la membrana mitocondrial interna y facilita la transferencia de electrones desde el succinato a la ubiquinona. Por su papel en la intersección entre el ciclo del ácido tricarboxílico (TCA) y la fosforilación oxidativa, SDHC contribuye al funcionamiento de la cadena respiratoria, al equilibrio redox mitocondrial y al metabolismo energético celular. La alteración de la integridad del complejo SDH puede modificar el manejo del succinato y las vías de señalización posteriores vinculadas a la reprogramación metabólica y a respuestas al estrés. La disfunción de SDHC se ha asociado con mecanismos de enfermedad mitocondrial y con la biología de predisposición tumoral, por lo que es relevante para estudiar fenotipos impulsados por el metabolismo y el control de calidad mitocondrial.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO SDHC (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SDHC en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SDHC junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SDHC tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SDHC.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SDHC para la investigación de la señalización de SDHC, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de SDHC críticos para la función de SDHC
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SDHC para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido SDHC CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SDHC CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SDHC. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SDHC (h) y el plásmido HDR SDHC (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SDHC para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SDHC definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.