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SCD双切口酶质粒(h) | sc-401516-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SCD双切口酶质粒(h2) | sc-401516-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD)是内质网中的关键酶,能够在饱和脂肪酰辅酶A上引入一个顺式(cis)双键,从而生成单不饱和脂肪酸,支持细胞膜流动性、脂滴生物发生以及蛋白质酰基化。通过调控饱和脂质与单不饱和脂质的平衡,SCD 影响从头脂肪生成、磷脂重塑,以及与内质网应激和氧化应激相关的信号网络。SCD 的活性与由 SREBP 和 PPAR 调控的代谢程序相整合,这些程序协同协调脂肪酸的合成与储存。SCD 表达或活性失衡与涉及胰岛素敏感性和肝脏脂质积累的代谢表型相关,并常在脂质依赖性生长与应激适应等研究背景中被重点关注。
SCD 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 SCD 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SCD内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏SCD的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了SCD基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。