Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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SAP 49 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h2): sc-407057-KO-2
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- SAP 49 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h2) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico SAP 49, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: SAP 49 Anticuerpo (G-12): sc-365570
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
SAP 49 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h2) | sc-407057-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
SF3B4 codifica el factor de empalme 3B, subunidad 4 (SAP 49), un componente central de la snRNP U2 dentro del complejo SF3b que favorece el reconocimiento preciso del punto de ramificación y del sitio de empalme 3′ durante el empalme del pre-ARNm. Al ayudar a ensamblar y estabilizar los complejos A y B del espliceosoma, SAP 49 influye en la selección de isoformas de transcritos y respalda programas coordinados de expresión génica vinculados a la progresión del ciclo celular, las respuestas al daño del ADN y la diferenciación. La alteración de la fidelidad del espliceosoma puede impulsar cambios generalizados en el empalme alternativo y la remodelación del proteoma, lo que convierte a SF3B4 en un nodo útil para estudiar redes de procesamiento de ARN en células humanas. Se han asociado la expresión alterada de SF3B4 y la disfunción del espliceosoma con estados patológicos en los que el empalme aberrante contribuye a respuestas de estrés celular y a un crecimiento desregulado.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO SAP 49 (h2) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SF3B4 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SF3B4 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SF3B4 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SAP 49.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SF3B4 para la investigación de la señalización de SAP 49, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de SF3B4 críticos para la función de SAP 49
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SF3B4 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido SAP 49 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SAP 49 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SF3B4. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SAP 49 (h) y el plásmido HDR SAP 49 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SF3B4 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SF3B4 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.