SA-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401222

Visão geral

STAG2 codifica a subunidade humana do complexo coesina SA-2, um componente central do complexo de coesina que medeia a coesão entre cromátides-irmãs e a organização do genoma em níveis superiores. A SA-2 sustenta a segregação cromossômica fiel durante a mitose e a meiose, contribui para o reparo de quebras de dupla fita no DNA e ajuda a regular interações de longa distância entre intensificadores (enhancers) e promotores que moldam programas de transcrição. Por meio dessas funções, STAG2 se relaciona com o controle do ciclo celular, respostas ao estresse de replicação e vias de arquitetura da cromatina. A disrupção de STAG2 é frequentemente observada em estudos genômicos de câncer e está associada à instabilidade cromossômica e à regulação gênica alterada, tornando-o um locus amplamente estudado em pesquisas sobre manutenção do genoma.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SA-2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene STAG2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do STAG2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do STAG2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SA-2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de STAG2 para a investigação da sinalização de SA-2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) STAG2 críticos para a função SA-2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos STAG2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo SA-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo SA-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus STAG2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo SA-2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR SA-2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia STAG2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo STAG2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.