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S-100A5慢病毒激活颗粒(h) | sc-418401-LAC | 200 µl | $455.00 |
人类基因 S100A5 编码 S-100A5,这是一种属于 S100 家族的 Ca2+ 结合型 EF-hand 蛋白,可作为钙传感器调节蛋白–蛋白相互作用以及依赖细胞状态的信号传导。S-100A5 与多种受钙调控的过程相关,包括细胞骨架组织、膜动力学以及转录反应,这与 S100 蛋白在神经元与上皮生物学中的广泛作用相一致。S100 家族表达模式的改变与炎症相关信号及肿瘤相关通路(如 MAPK 和 NF-κB)有关,因此 S100A5 可作为研究细胞应激反应与分化程序的有用标志物和机制节点。其具有情境依赖性的表达特征,也支持其用于疾病相关模型中谱系指定、信号整合与通路重编程等方面的研究。
S-100A5 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 S100A5 表达。
S-100A5 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在S100A5转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性S-100A5表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 S100A5 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。