S-100A16 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-406149-LAC

S100A16 codifica a S-100A16, uma pequena proteína ligante de cálcio do tipo EF-hand da família S100, que contribui para a sinalização dependente de Ca2+ e para a modulação de interações proteína–proteína. A S-100A16 tem sido associada à regulação da diferenciação celular, à dinâmica do citoesqueleto e a processos associados à membrana, sendo frequentemente estudada no contexto de respostas ao estresse e de remodelação metabólica. Padrões alterados de expressão de S100A16 foram relatados em múltiplos tipos de tumor e em contextos cardiometabólicos e inflamatórios, sustentando seu uso como marcador e como nó funcional em vias relevantes para doenças. Como uma proteína semelhante a sensor de cálcio, a S-100A16 pode influenciar indiretamente programas transcricionais por meio de redes de sinalização que acoplam fluxos de cálcio a mudanças no estado celular.

As Partículas de Ativação Lentivirais S-100A16 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de S100A16 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais S-100A16 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição S100A16, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de S-100A16. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo S100A16 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.