Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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RTEL1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-403196
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- RTEL1 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico RTEL1, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: RTEL1 Antibody (H-5): sc-515427
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
RTEL1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-403196 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
RTEL1 codifica Regulator of Telomere Elongation Helicase 1, un’elicasi del DNA che preserva la stabilità del genoma promuovendo una replicazione e una riparazione del DNA fedeli. RTEL1 smantella strutture secondarie aberranti del DNA, come i G-quadruplex, e risolve i T-loop telomerici, sostenendo il mantenimento dei telomeri e prevenendo ricombinazioni inappropriata. Agisce in vie legate alla progressione della forcella replicativa, al controllo della ricombinazione omologa e alla segnalazione della risposta al danno al DNA. L’alterazione dell’attività di RTEL1 è associata a disfunzione telomerica e a fenotipi di instabilità genomica implicati in disordini ereditari della biologia dei telomeri e nella suscettibilità al cancro.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO RTEL1 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene RTEL1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del RTEL1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto RTEL1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina RTEL1.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di RTEL1 per lo studio della segnalazione di RTEL1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni RTEL1 critici per la funzione di RTEL1
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di RTEL1 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal RTEL1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal RTEL1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus RTEL1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal RTEL1 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR RTEL1 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia RTEL1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio RTEL1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.