RP105 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-409643-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RP105O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase RP105 (h) e o Plasmídeo Double Nickase RP105 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CD180. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:RP105 Anticorpo (MHR73): sc-52721
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RP105 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-409643-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RP105 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-409643-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O CD180 humano codifica a RP105, um membro da família dos receptores do tipo Toll que forma um complexo com a MD-1 e atua como componente regulador da sinalização imune inata em células B e em células apresentadoras de antígeno. A RP105 modula as respostas ao lipopolissacarídeo e a outros estímulos microbianos, ajustando a atividade a jusante das vias NF-κB e MAPK, o que influencia a produção de citocinas, a proliferação e a sobrevivência celular. Por seu papel no controle dos limiares de sinalização associados ao TLR4 e dos estados de ativação das células B, o CD180 é relevante para estudos de regulação inflamatória e de desregulação imune observada em contextos de autoimunidade, biologia de infecções e neoplasias impulsionadas por células B. Alterações na expressão da RP105 e no equilíbrio de sua sinalização têm sido associadas à ativação imune aberrante e a mudanças nas respostas imunes humorais, tornando-a um ponto útil para a investigação mecanística do crosstalk entre imunidade inata e adaptativa.
RP105 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CD180 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CD180. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CD180. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CD180 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.