RNF40 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-404156
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- RNF40 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在RNF40基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：RNF40: sc-293333，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
RNF40 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-404156 | 20 µg | $397.00 |
概述
RNF40 编码一种带有 RING 指结构域的 E3 泛素连接酶，它必须与 RNF20 形成异源二聚体，才能对组蛋白 H2B 进行单泛素化（H2BK120ub）。H2BK120ub 是一种关键的染色质修饰，可将转录延伸与表观遗传层面的串扰联系起来，并与 H3K4 和 H3K79 的甲基化相关联。通过这一活性，RNF40 调控依赖 RNA 聚合酶 II 的基因表达程序、染色质可及性，以及在复制应激或 DNA 双链断裂位点需要染色质重塑的协同 DNA 损伤应答。RNF40 依赖的 H2B 泛素化会影响细胞周期控制和谱系特异性的转录网络，因此与基因组稳定性研究，以及癌症和其他增殖性疾病中观察到的转录失衡密切相关。RNF40 信号的改变还与炎症和发育通路的变化有关，其机制可能是通过对增强子与启动子功能进行情境依赖性的调控来实现的。
RNF40 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中RNF40基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对RNF40基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏RNF40开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使RNF40蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建RNF40缺失的细胞模型，用于RNF40信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 RNF40 功能至关重要的 RNF40 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 RNF40 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 RNF40 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 RNF40 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 RNF40 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 RNF40 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 RNF40 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由RNF40同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定RNF40靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。