RNF20 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-412695-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RNF20O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase RNF20 (h) e o Plasmídeo Double Nickase RNF20 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para RNF20. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:RNF20 Anticorpo (1594CT552.128.36): sc-517358
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RNF20 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-412695-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RNF20 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-412695-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RNF20 codifica uma ligase E3 de ubiquitina que, em conjunto com a RNF40, forma o complexo BRE1, responsável pela monoubiquitinação da histona H2B (H2BK120ub). Essa modificação da cromatina promove o alongamento da transcrição e se acopla a programas downstream de metilação de histonas, influenciando a expressão gênica em todo o genoma, a sinalização de dano ao DNA e a escolha de vias de reparo. A atividade de RNF20 está ligada à manutenção da estabilidade genômica por meio da regulação das respostas a quebras de dupla fita e do remodelamento de cromatina associado à replicação. A desregulação da ubiquitinação de histonas dependente de RNF20 tem sido associada a redes transcricionais alteradas e à instabilidade genômica observada em múltiplos contextos de doença, sustentando seu estudo em mecanismos epigenéticos e de reparo do DNA.
RNF20 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus RNF20 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de RNF20. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função RNF20. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com RNF20 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.