Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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RNase L Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403412-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RNase LO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase RNase L (h) e o Plasmídeo Double Nickase RNase L (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para RNASEL. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:RNase L Anticorpo (E-9): sc-74405
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RNase L Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403412-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RNase L Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403412-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O RNASEL humano codifica a RNase L, uma endorribonuclease induzível por interferon ativada por oligoadenilato 2′-5′ produzido por enzimas OAS durante o reconhecimento imune inato de RNA de dupla fita viral e celular. Uma vez ativada, a RNase L cliva RNA de fita simples para restringir a replicação de patógenos, remodelar o transcriptoma celular e amplificar a sinalização antiviral por vias como RIG-I/MDA5–MAVS e as respostas subsequentes de interferon do tipo I. A atividade da RNase L também influencia a estabilidade do RNA, o controle da tradução e respostas ao estresse, ligando-a a uma regulação mais ampla do crescimento celular e da apoptose. Variações genéticas ou desregulação em RNASEL têm sido associadas a alterações na defesa antiviral e a fenótipos relacionados à inflamação, reforçando sua relevância em estudos de sinalização imune e de mecanismos de suscetibilidade a doenças.
RNase L O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus RNASEL em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de RNASEL. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função RNASEL. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com RNASEL interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.