Ribosomal Protein L26 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406835

概要

RPL26はリボソームタンパク質L26をコードしており、60S大サブユニットの構造構成要素として、リボソームの組み立てや細胞質mRNAの効率的な翻訳に寄与します。タンパク質合成における中核的役割にとどまらず、RPL26はストレス応答性の翻訳プログラムの制御にも関与することが示されており、主要転写産物の翻訳に影響することでp53経路シグナル伝達を調節する可能性が報告されています。リボソームタンパク質の恒常性が乱れるとリボソームストレス応答が誘導され、細胞周期制御が変化し得るため、RPL26はゲノム安定性、アポトーシス、がんやその他の増殖性疾患における翻訳制御異常といった文脈での研究対象として注目されています。

Ribosomal Protein L26 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるRPL26遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、RPL26内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、RPL26のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Ribosomal Protein L26タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Ribosomal Protein L26シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、RPL26欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Ribosomal Protein L26の機能に不可欠なRPL26エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、RPL26ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Ribosomal Protein L26 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびRibosomal Protein L26 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、RPL26遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Ribosomal Protein L26 HDRプラスミド（h）および Ribosomal Protein L26 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはRPL26ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のRPL26標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。