Ribosomal Protein L22L1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-402323

概要

RPL22L1は、60S大リボソームサブユニットの構成要素であるリボソームタンパク質L22L1をコードしており、リボソーム生合成および効率的なmRNA翻訳を支えます。翻訳制御への寄与を通じて、RPL22L1は、選択的なmRNAのリクルートやリボソーム機能に依存するプロテオスタシス、細胞周期の進行、ストレス適応プログラムに影響を及ぼし得ます。リボソームタンパク質やリボソーム組立因子の制御異常は、増殖プログラムやゲノム維持経路の破綻としばしば関連するため、RPL22L1は増殖状態におけるリボソーム関連の脆弱性を研究する上で重要です。そのため本遺伝子は、翻訳能力と細胞恒常性、ならびに疾患関連表現型を結び付ける機構研究において関心の対象となります。

Ribosomal Protein L22L1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるRPL22L1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、RPL22L1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、RPL22L1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Ribosomal Protein L22L1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Ribosomal Protein L22L1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、RPL22L1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Ribosomal Protein L22L1の機能に不可欠なRPL22L1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、RPL22L1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Ribosomal Protein L22L1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびRibosomal Protein L22L1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、RPL22L1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Ribosomal Protein L22L1 HDRプラスミド（h）および Ribosomal Protein L22L1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはRPL22L1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のRPL22L1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。