RHOBTB3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406242
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RHOBTB3 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico RHOBTB3, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RHOBTB3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406242 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
RHOBTB3 codifica uma GTPase atípica da família Rho com domínios BTB, que atua como adaptadora ao conectar o tráfego de membranas à degradação de proteínas dependente de ubiquitina. RHOBTB3 tem sido implicada na organização do Golgi e de endossomos, no transporte vesicular e na regulação da progressão do ciclo celular por meio de interações com complexos de ligase E3 de ubiquitina baseados em Cullin3. Ao influenciar o tráfego intracelular e a proteostase, RHOBTB3 pode modular respostas de sinalização que dependem da reciclagem de receptores e da atividade compartimentalizada de pequenas GTPases. A desregulação desses processos tem sido associada a alterações de proliferação e migração relatadas em estudos relacionados ao câncer, reforçando sua relevância para pesquisas em oncologia mecanística e biologia celular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO RHOBTB3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene RHOBTB3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do RHOBTB3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do RHOBTB3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína RHOBTB3.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de RHOBTB3 para a investigação da sinalização de RHOBTB3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) RHOBTB3 críticos para a função RHOBTB3
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos RHOBTB3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo RHOBTB3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo RHOBTB3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus RHOBTB3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo RHOBTB3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR RHOBTB3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia RHOBTB3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo RHOBTB3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.