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RELA/NFκB p65双切口酶质粒(h) | sc-400004-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RELA/NFκB p65双切口酶质粒(h2) | sc-400004-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RELA 编码 NFκB 的 p65 亚基,是关键的转录因子,常与 NFKB1/p50 形成异源二聚体,用于调控可诱导的基因表达程序,从而控制炎症、先天与适应性免疫反应、细胞存活以及应激信号传导。在经典 NFκB 信号通路中,TNF、IL-1 以及模式识别受体的激活等上游刺激汇聚到由 IKK 介导的 IκB 磷酸化与降解过程,使 p65 得以转位入核并激活转录。RELA 的活性还会受到翻译后修饰以及与 MAPK、JAK/STAT 和干扰素通路的串扰调控,进而影响细胞因子产生、抗凋亡能力与细胞分化。NFκB/RELA 信号失调常与慢性炎症状态和肿瘤发生过程相关,包括肿瘤微环境信号的异常以及生存通路的持续激活。
RELA/NFκB p65 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 RELA 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对RELA内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏RELA的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了RELA基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。