RECK Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402440-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RECKO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase RECK (h) e o Plasmídeo Double Nickase RECK (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para RECK. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:RECK Anticorpo (G-4): sc-373929
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RECK Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402440-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RECK Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402440-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RECK (proteína rica em cisteína com motivos Kazal, indutora de reversão) é um regulador ancorado à membrana da remodelação da matriz extracelular que suprime a atividade de múltiplas metaloproteinases de matriz, incluindo MMP2, MMP9 e MT1-MMP/MMP14. Ao restringir a proteólise pericelular, RECK influencia a adesão célula–matriz, a migração e o comportamento invasivo, além de contribuir para a morfogênese vascular e tecidual. A função de RECK intersecciona-se com vias que governam a dinâmica epitélio–mesênquima e a sinalização dependente de proteases no microambiente tumoral. A redução da expressão de RECK ou o desequilíbrio na relação RECK–MMP tem sido associada ao aumento da degradação da matriz em diversos contextos de câncer e em outras patologias caracterizadas por remodelação aberrante.
RECK O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus RECK em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de RECK. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função RECK. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com RECK interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.