Ran BP-3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405001-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Ran BP-3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Ran BP-3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Ran BP-3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para RANBP3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Ran BP-3 Anticorpo (D-2): sc-377253
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Ran BP-3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405001-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Ran BP-3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405001-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RANBP3 codifica a proteína 3 de ligação a Ran (Ran BP-3), um cofator de exportação nuclear que participa do transporte nucleocitoplasmático dependente de RanGTP. A Ran BP-3 interage com receptores de exportação para dar suporte à exportação mediada por CRM1/XPO1 e contribui para manter a distribuição nuclear–citoplasmática adequada de proteínas regulatórias e RNAs. Por meio de seu papel na dinâmica do transporte, a RANBP3 se conecta a vias que controlam programas transcricionais, a progressão do ciclo celular e respostas ao estresse. A desregulação da maquinaria de exportação nuclear, incluindo fatores que modulam Ran e a função de exportinas, está implicada em alterações de sinalização e em fenótipos de estabilidade genômica relevantes para o câncer e outros contextos proliferativos ou neurodegenerativos.
Ran BP-3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus RANBP3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de RANBP3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função RANBP3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com RANBP3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.