Rad54B Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403794-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Rad54BO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Rad54B (h) e o Plasmídeo Double Nickase Rad54B (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para RAD54B. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Rad54B Anticorpo (19-K2): sc-101234
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Rad54B Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403794-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Rad54B Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403794-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RAD54B codifica a Rad54B, uma ATPase dependente de DNA da família SWI2/SNF2 que atua na recombinação homóloga ao cooperar com a RAD51 para remodelar o DNA e promover a invasão de fita durante o reparo de quebras de dupla fita. A Rad54B contribui para a estabilidade do genoma por meio de funções na sinalização da resposta a danos no DNA, no reparo associado à replicação e na recuperação do estresse genotóxico, conectando-se às vias centrais de recombinação homóloga e às vias de checkpoint mediadas por recombinação. A alteração da atividade de RAD54B pode aumentar a instabilidade cromossômica e a carga mutacional, características frequentemente estudadas no contexto da biologia tumoral e de estados com defeitos de reparo de DNA. Assim, RAD54B é amplamente investigado por seu impacto na eficiência de recombinação, na sensibilidade a agentes que causam danos ao DNA e nos mecanismos que regem a manutenção fiel dos cromossomos.
Rad54B O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus RAD54B em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de RAD54B. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função RAD54B. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com RAD54B interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.