Rac 1CRISPR激活质粒(m): sc-422573-ACT
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Rac 1 CRISPER激活质粒（m）是一种协同激活介质（SAM）转录激活系统，目的在于特定上调基因表达
- Rac 1 CRISPR 激活质粒 (m)包含三种质量比为1:1:1的质粒：一种质粒编码与转录激活结构域VP64融合的去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，和杀稻瘟素抗性基因；一种质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白，和潮霉素抗性基因；一种质粒编码与两个MS2 RNA适体融合的目标特异的20 nt向导RNA，和嘌呤霉素抗性基因。
- 形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域，为高效激活基因提供转录因子的招募
- 由 Rac 1 CRISPR 激活质粒 (m) 和 Rac 1 CRISPR 激活质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别针对 Rac1 转录起始位点上游的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Rac 1CRISPR激活质粒(m) | sc-422573-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
Rac 1CRISPR激活质粒(m2) | sc-422573-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
Rac1 编码 Rac1 蛋白，它属于 Rho 家族的小 GTP 酶，可在 GDP 结合态与 GTP 结合态之间切换，从而协调肌动蛋白细胞骨架重塑、片状伪足（lamellipodia）形成以及细胞极性建立。在小鼠细胞中，RAC1 整合来自受体酪氨酸激酶、整合素和趋化因子受体的信号，调控涉及 PAK、PI3K/AKT、MAPK 以及依赖 WAVE/ARP2/3 的肌动蛋白成核等通路。这些过程会影响黏附动态、囊泡运输，以及通过 NADPH 氧化酶复合体介导的活性氧（ROS）信号传导。RAC1 活性失衡与迁移和侵袭表型改变、异常的发育信号以及肿瘤生物学相关，因此它是研究细胞骨架控制与信号转导机制中的关键节点。
Rac 1 CRISPR激活质粒（m）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性Rac1的表达。
Rac 1 CRISPR激活质粒（m）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的Rac1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于Rac1转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性Rac 1表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的Rac1位点，并能够研究内源性位点上依赖于Rac 1的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在Rac1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Rac 1通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。