Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO Rab 33B (h): sc-404070
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Rab 33B Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Rab 33B, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Rab 33B Antibody (RR-3): sc-81920
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Rab 33B (h) | sc-404070 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
RAB33B code la petite GTPase Rab 33B, un membre de la famille Rab qui coordonne les événements de trafic membranaire à l’interface Golgi–RE (réticulum endoplasmique). Rab 33B régule la formation des vésicules, le tri des cargaisons et l’homéostasie du Golgi, et a été impliquée dans des étapes de trafic liées à l’autophagie qui influencent la dynamique des organites. Par ces fonctions, elle contribue à l’organisation de la voie sécrétoire et à la fidélité du transport intracellulaire, des processus fréquemment perturbés dans des phénotypes neurodéveloppementaux et neurodégénératifs. Une altération de la fonction de RAB33B a été associée à des troubles squelettiques et du développement syndromiques, ce qui souligne son intérêt pour l’étude de l’homéostasie cellulaire dépendante du trafic.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Rab 33B (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène RAB33B dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du RAB33B, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert RAB33B à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Rab 33B.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en RAB33B pour l'étude de la signalisation de Rab 33B, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de RAB33B essentiels à la fonction de Rab 33B
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de RAB33B pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Rab 33B plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Rab 33B plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus RAB33B. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Rab 33B plasmide HDR (h) et le Rab 33B (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie RAB33B pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles RAB33B définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.