PTPβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402100
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PTPβ O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PTPβ, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PTPβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402100 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
PTPRB codifica a fosfatase tirosina-proteína do tipo receptor beta (PTPβ), uma fosfatase enriquecida no endotélio que contrabalança a sinalização de receptores tirosina-quinase para modular o desenvolvimento vascular, a função de barreira e as respostas angiogénicas. Ao desfosforilar nós de sinalização ligados às vias de VEGF/FGF e à remodelação das junções, a PTPβ ajuda a ajustar a migração das células endoteliais, a permeabilidade e a estabilização dos vasos. Alterações na atividade ou na expressão de PTPRB têm sido associadas a angiogénese e homeostase vascular desreguladas, o que a torna relevante para estudos de extravasamento vascular associado à inflamação e de neovascularização associada a tumores. O seu papel regulador na sinalização dependente de fosforilação também sustenta investigações mecanísticas sobre a diferenciação endotelial e a formação de redes microvasculares.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PTPβ (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PTPRB em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PTPRB, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PTPRB na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PTPβ.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PTPRB para a investigação da sinalização de PTPβ, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PTPRB críticos para a função PTPβ
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PTPRB para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PTPβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PTPβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PTPRB. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PTPβ Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PTPβ (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PTPRB para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PTPRB definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.